适配体中心介绍

 

    上海伯豪医学检验所有限公司适配体中心（以下简称“中心”），与美国哈佛医学院资深教授合作多年，致力于共同开发适配体筛选和应用技术，利用适配体的特性进一步发展科研和临床产品。中心还与华山医院消化疾病研究所建立了长期合作关系。

    中心通过多年的自主研发，目前已建立了国际领先的蛋白靶标适配体筛选、优化和鉴定平台。二代筛选平台可以大幅提高筛选的成功率。中心将继续努力推动适配体技术在科学研究，临床诊断和药物开发领域的应用，向广大科研人员提供技术服务。

 

 

 

 

什么是适配体

 

    适配体是一类长度小于100nt，具有一定序列的单链寡核苷酸。经过自身形成的三维结构，能与靶标实现高亲和力、高特异性识别，与抗体异曲同工，又被称为“化学抗体”。这种新型的识别分子目前被广泛应用于诊断、纯化和治疗领域。

 

      参考文献：King M. Global aptamer market to increase by a massive 106.3%. Companies and Markets, Vertical Edge Limited, 2012.

适配体与抗体的主要区别

 

  适配体与抗体可以达到异曲同工的效果，但在某些方面又比抗体更有优势。

  首先，适配体的主要成分是核酸，热稳定性较抗体好。

  其次，适配体能通过体外筛选获得，对靶标没有免疫原性要求，而抗体则一般要求抗原具有较强的免疫原性，并且不能对宿主动物产生毒性。因此，适配体可以识别的靶标种类十分广泛（包括蛋白，多肽等），也可以应对病毒、耐药菌、耐药细胞等高突变靶标。无法获得抗体的靶标往往可以找到与之识别的适配体分子。

  适配体主要通过化学合成的方式进行生产。这使得生产成本低，而且产物纯度高，批间重复性好，免去了抗体每一批都需要经过滴度测定的困扰。

  适配体可以很容易的进行各种生物和化学修饰，是抗体望尘莫及的。

 

 

 

适配体的筛选：SELEX

 

    适配体主要通过指数富集的配基系统进化技术（SystematicEvolution ofLigands by Exponential Enrichment，SELEX）体外筛选获得。

    SELEX技术的基本思想是体外化学合成一个单链寡核苷酸库，用它与靶物质混合，混合液中存在靶物质与核酸的复合物，洗掉未与靶物质结合的核酸，分离与靶物质结合的核酸分子，以此核酸分子为模板进行PCR扩增，进行下一轮的筛选过程。通过重复的筛选与扩增，一些与靶物质不结合或与靶物质有低亲和力、中亲和力的DNA或RNA分子被洗去，而"适配体"(Aptamer)即与靶物质有高亲和力的DNA或RNA从非常大的随机文库中分离出来，且纯度随SELEX过程的进行而增高，从P摩尔到n摩尔，最后占据库的大多数(>90%左右)。

 

 

 

 

 

 

  

 

 

 

一代筛选技术

 

    筛选的起点是一个人工设计的含有多达1015种不同序列分子的文库。这些分子与靶标孵育结合后，结合于靶标的分子经过分离，再扩增，可以形成一个次级文库，投入到新一轮次的筛选。一般经过6~15个轮次，就可以获得与靶标特异性结合的分子。经过克隆和测序，可以明确其序列并用于生产[1]。

 

 

    一个标准的筛选轮次一般需要1~2天时间。完成整个筛选，克隆和序列鉴定，全程仅需1~2个月。相比较而言，获得一个单克隆抗体一般需要6个月的时间。较短的研发周期也意味着较低的研发成本0

 

      参考文献：[1] Stoltenburg, R., C. Reinemann and B. Strehlitz, SELEX--a (r)evolutionary method to generate high-affinity nucleic acid ligands. Biomol Eng, 2007. 24(4): p. 381-403.

 

 

二代筛选技术

   

    在适配体中掺入修饰碱基是适配体技术近年来最重要的进展之一。掺入的修饰碱基使得适配体具有更好的三维空间结构与靶标分子结合，从而使筛选的成功率大大提升，并且降低了适配体与靶标之间的解离速率。伯豪适配体中心通过自主研发，合成了独特的侧链修饰碱基IAA-dUTP，并建立了具有自主知识产权的标准化筛选平台。我们相信，这将推动适配体在国内研究和应用领域的快速发展。

 

 

适配体定制筛选服务

      伯豪适配体中心经过数年的技术攻关，积累了丰富的筛选经验。目前推出了一代、二代和RNA三大适配体筛选服务平台。服务平台具有标准化的流程，并与多样检测技术配套，可以快速评估和鉴定已知适配体的专一性和亲和力。这些技术包括ELASA检测，免疫杂交，免疫沉淀，流式，SPR等。合理配套的系统化筛选平台，可为客户定制蛋白靶标的筛选流程。

      同时，我们也在不断开拓新的领域，将推出细胞靶标等的筛选技术，以满足不同科研需求。我们希望能利用我们的适配体筛选平台及国内科研团队，更好的挖掘和开发适配体潜力，助力适配体在国内科研和临床等更多领域的广泛应用。

      如您有适配体筛选的需要和意向，请您联系我们，我们竭诚为您服务！